电泳系统:让 DNA 和蛋白质“跑起来”分大小

电泳是分子生物学最常用的分离技术。这篇讲清它怎么让分子按大小排成队、怎么跑胶、怎么读结果。
PCR 做完了,怎么知道有没有真的扩出目标 DNA?
蛋白质提出来了,怎么判断纯度够不够?
实验室里最常见的回答是两个字:跑胶——也就是做一次电泳。
这篇用大白话讲清电泳系统是怎么让分子“按大小排成队”的,以及怎么读出一张合格的凝胶照片。
01 电泳是什么
一句话:电泳是利用电场让带电分子移动,并借凝胶的“筛子”作用把它们按大小分开。
DNA 带负电,放进电场就往正极跑;跑得快慢由分子大小决定——小的钻得快、大的被凝胶卡住走得慢。跑一会儿,大小不同的分子就分成了不同位置的“条带”。
02 原理三步
① 加样——把样品滴进凝胶一端的加样孔。
② 通电——电源在凝胶两端加上电压,分子开始朝正极跑。
③ 成像——染色后照紫外光(DNA 用核酸染料),条带显形,和旁边已知大小的 Marker(分子量标准)一对比,就知道片段有多大。
03 两种主流玩法
▸ 琼脂糖凝胶电泳——跑 DNA,最常见。胶像果冻,孔径大,适合分离几百到几万碱基的片段。
▸ SDS-PAGE(Sodium Dodecyl Sulfate-Polyacrylamide Gel Electrophoresis,十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳)——跑蛋白质。加洗涤剂让蛋白都带上负电并展开,再按大小分离,是蛋白实验的看家本领。
04 电泳系统由什么组成
电泳电源负责给凝胶槽提供稳定电场。
一套电泳系统通常三件:
▸ 电泳槽——放凝胶和缓冲液,中间有电极。
▸ 电源——提供稳定的电压或电流。
▸ 成像设备——紫外透射仪或凝胶成像系统,把条带照出来、拍下来。
05 怎么跑一次合格的胶
① 制胶——按片段大小配好琼脂糖浓度,倒胶、插梳子、等凝固。
② 上样——样品加 loading buffer(上样缓冲液,让样品沉底并带颜色指示),逐个加孔。
③ 跑胶——设定电压(一般 5~10 V/cm),等指示剂跑到合适位置。
④ 成像——取出凝胶,紫外灯下观察并拍照。
跑完的凝胶在紫外灯下一照,条带清晰可见。
06 新手最容易踩的坑
① 电压开太高——胶发热、条带弯曲成“笑脸”,大小判断就乱了。
② 胶浓度不对——分离大片段用高浓度胶,分子根本钻不进去。
③ 上样过多或过少——过载条带糊成一团,太少又看不见。
④ 忘记放 Marker——没有“尺子”,条带大小无从判断。
⑤ 紫外照射过久——DNA 会被紫外线打断,拍完赶紧收。
07 结果怎么看、仪器怎么选
看结果:条带清晰、位置正确、无拖尾、Marker 完整,就是一张合格的胶。
选系统:▸ 通量(跑几个样本);▸ 电压电流范围;▸ 成像清晰度与灵敏度;▸ 是否带安全断电保护。
写在最后
电泳是分子生物学“入场券”——PCR 产物验证、克隆筛选、蛋白纯度检查,样样离不开它。
一条清晰的条带背后,是电压、胶浓度、上样量三个变量的默契配合。跑胶跑得好,实验就成功了一半。
核心信息来源
· 封面/配图:My-GEL 小型电泳系统、BIOBASE BPS-1 电泳电源、琼脂糖凝胶电泳结果实拍(来源:设备厂商与学术公开图)
· 电泳分离原理(带电分子在电场中迁移、凝胶筛分)与琼脂糖凝胶电泳、SDS-PAGE 为分子生物学教材通用共识
· 电压、胶浓度、上样量等参数以各实验 SOP 为准
声明:本文为科普介绍,截至 2026-10-28;配图为设备厂商与图库公开实拍,非 AI 生成;具体参数与质控标准以各实验室 SOP 为准。
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