KNIT 编辑：不切双链的精准敲入

经典 CRISPR-Cas9 靠制造 DNA 双链断裂（DSB）来编辑基因，但 DSB 伴随易位、大片段缺失等安全隐患。2026 年 7 月，清华大学王海峰团队在 Nature 提出 KNIT 编辑：用 Cas9 切口酶（nickase）只切一条链，诱导细胞以"复制叉"方式精准插入长达千碱基的外源片段。

不制造 DSB，意味着脱靶与染色体易位风险大幅下降；而"千碱基级"插入能力，足以把整个功能基因、报告基因或调控盒一次性敲入。这为安全基因治疗（如原位修复致病基因、插入治疗性转基因）提供了更温和的工具。

图1：切口酶引导的精准敲入，规避双链断裂风险

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